【調查】PCR有用嗎?聚合酶連鎖反應(核酸RNA檢測)是什麽?原理

PCR 機器1

***得了武漢肺炎 COVID-19 該怎麽辦?除了疫苗,是否還有別的方法預防?***

有些病毒(virus)太小了,所以,要如何檢測人體體内是否有這個病毒呢?其中一個選項就是 PCR聚合酶連鎖反應檢測~

目前的武漢肺炎(COVID-19)的病毒為 SARS-CoV-2,極其的微小,而主流是采用 PCR 此方法來檢測是否有得武漢肺炎。

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PCR 為聚合酶連鎖反應(Polymerase chain reaction,又稱多聚酶鏈式反應、核酸檢測)是將特定的基因多次複製,進行放大觀測 RNA 的量。每次放大就是以二次方等比級數增加,也就是 1 個單位的 Ct值 (Cycle Threshold)。

檢測有3個步驟:
1)采樣+取出:一個棉花棒進鼻子或更深的地方采取樣本。將病毒樣本取出。
2)放大:把病毒的RNA、DNA放大倍數。
3)PCR檢測:做檢測。

DNA 是一個雙股的結構,兩條單股互相盤繞。一條(一股)上面有 4 種鹼基即:腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)、鳥嘌呤(G)。A永遠對應T,C永遠對應G。
一股的DNA就是RNA。

問題:如果一股上是T,請問另外一股對應的是什麽?
答案:A。

在 PCR 測試中,人工合成的短DNA片段,小塊的「引子」(primer)會跟病毒的RNA結合,開始放大(amplification)。武漢肺炎(新冠病毒)是單股的,RNA,所以要先複製成像拉鏈的雙股DNA,才可開始檢測。把零散的武漢肺炎病毒慢慢放大、鏈接,把整串武漢肺炎 COVID-19 DNA 做出來。

每次放大就是以二次方等比級數增加,也就是 1 個單位的 Ct值。Ct 34 就是34個複製周期,2的34次方等於:17,179,869,184。

ppm的意思是百萬分之一(parts per million),而 ppb 則是10億分之一(parts per billion),而 Ct 34 等於 17億分之一!!!

當有熒光的標記開始跟複製的基因鏈接,電腦就可查詢放大的效益。如果病毒樣本不夠(沒有得病),就不會、也無法完成放大效果。

陽性:樣本裏有病毒基因,放大過程有順利執行。
陰性:樣本裏病毒基因不夠,放大過程無法順利執行。

PCR 的爭議與準確度:

1)被檢測病毒並不一定是活性的病毒。
2)Jaafar et el. 2021/6。表示,Ct 35 準確度不到3%。意思是超過97%的檢測,結果會是錯的!!!
3)葡萄牙政府已宣佈 PCR 不可靠。
4)超過 Ct 25 (倍數過大)的檢測,70%的結果完全不可靠。
5)PCR 會顯示部分、特定基因的病毒,但無法顯示病毒。也就是盲人摸象。
6)英國 Eurosurveillance 顯示,大於 Ct 35的時候,準確度約 8.3% (95% CI)。。
7)PCR 有可能檢測到病毒殘留,就算病已經好了。

PCR檢測1
PCR檢測1
DNA2
DNA2
DNA1
DNA1

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